流式荧光染料藻红蛋白（沉淀）活化前的处理步骤是怎样的呢？
2022-06-17 15:11:02 点击：
前两天有位L老师询问了崔工一个问题。
L老师问，市面上的流式荧光染料藻红蛋白有沉淀形态的，有晶体形态的，还有冻干粉形态的。
自己看沉淀比较便宜，自己又是第一次做，就订购了沉淀练练手。
但拿到藻红蛋白沉淀后具体怎么操作，说明书上没有写。
是的，不管是国外的产品，还是崔工家的产品，随同产品发出的都是没有具体的操作说明的，只有一份说明书和COA。
为什么不放操作说明呢，不是厂家不放，是厂家不知道客户拿去具体做什么实验的，不好推荐。
在前面崔工的文章中，崔工很详细的讲过沉淀、晶体、冻干粉之间的区别。
藻红蛋白是从海藻中提炼出来的高纯度蛋白，能达到95%以上。
这样高纯度的蛋白是很容易变性的。
所有通用的做法是保存在硫酸铵盐中，或者是做成冻干粉。
也就是说沉淀在活化前是需要脱盐的。
崔工建议L老师按照这样的步骤进行处理：
第一步，取出藻红蛋白沉淀产品，混匀。
第二步，用移液器取出标记抗体所需要量已混匀的沉淀产品。
第三步，加入到离心管中，放入离心机离心，离心力1000g左右。
第四步，小心翼翼的以前离心管中上清，尽可能的只留下离心管最底端的藻红蛋白产品。
第五步，加入标记抗体条件的PBS溶液溶解藻红蛋白，浓度最好是5mg/ml，溶解好的藻红蛋白是透明发亮的，如果是浑浊状态，说明未完全溶解。
第六步，将溶解好的藻红蛋白加入脱盐柱、超滤管、或者透析袋中脱盐，建议用脱盐柱，方便快捷。
脱盐好的藻红蛋白就可以进行后面的活化步骤了。
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