流式荧光和ELISA、间接免疫荧光法、化学发光法、免疫印迹法之间的比较
2018-04-21 15:41:18 点击：
1、流式荧光与化学发光的比较
以TORCH十项为例：
方法学 | 流式荧光法 | 化学发光法 |
光衰减 | 激光激发发光，不衰减 | 衰减严重 |
通量 | 高通量，同时检测多个项目 | 每次仅能检测一个项目 |
灵敏度 | 高 | 高 |
重复性 | 极好 | 好 |
需要试剂盒数目 | 2个（IgG与IgM试剂盒） | 10个 |
劳动强度 | 1 | 5倍 |
工作效率 | 5倍 | 1 |
所需样本量 | 10-20ul | 100ul以上 |
定标 | 孔内定标 | 单独定标（每次需消耗4-6个人份） |
试剂成本 | 相对较低 | 极高 |
2、流式荧光与ELISA的比较
以ANA十项为例：
方法学 | 流式荧光法 | ELISA法 |
反应动力学 | 液态均相，面积大，反应充分 | 微孔表面，反映面积有限，反应不充分。 |
通量 | 高通量，同时检测十个项目 | 每次仅能检测一个项目 |
灵敏度 | 荧光发光，灵敏度高 | 一般 |
重复性 | 极好 | 一般 |
定标 | 孔内定标 | 单独定标（每次需消耗4-6个人份） |
试剂消耗 | 1盒 | 10盒 |
劳动强度 | 1倍 | 10倍 |
工作效率 | 10倍 | 1倍 |
所需样本量 | 10ul | 100ul以上 |
时间 | 2.5小时 | 连续操作10小时以上 |
定标 | 孔内定标，消除干扰 每孔单独定标 | 单独定标（每次需消耗4-6个人份） 每板定标，每次定标 |
3、流式荧光与IFA（间接免疫荧光法）的比较
以ANA检测为例：
方法学 | 流式荧光法 | IFA法 |
灵敏度 | 高 | 由于SSA和Jo-1抗原在真核细胞中的表达量不高，而且细胞固定剂对于抗原结构也可能产生影响，因此基于培养细胞作为基质的间接免疫荧光法绝非抗SSA和Jo-1抗体的最佳检测方法。 容易造成漏检 |
结果 | 客观的数值型结果 | 人眼通过显微镜观察的主观结果 对操作者的经验要求高 |
重复性 | 极好 | 差 |
结果解释 | 同时报告ANA和常见分型的结果 | 阴性结果可能有10-20%的漏检 阳性结果还需ELISA或印迹法进行分型确认。 |
4、流式荧光与免疫印迹法的比较
以ANA检测为例：
方法学 | 流式荧光法 | 印迹法 |
方法学比较 | 微珠和血清均悬浮在液体中，均相反应，反应充分 | 样本悬浮在液体中，仅与膜条接触区域可反应，反应不充分 |
灵敏度 | 发光法，灵敏度高 | 低 |
结果 | 客观的数值型结果 | 人眼观察，有些临界结果很难判断
|
结果统计 | 至少50次测试的中位值 | 1次检测结果 |
结果报告 | 结果可与医院LIS系统对接 | 手工输入 |
重复性 | 极好 | 一般 |
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