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荧光素的种类及选择

2017-06-11 18:05:33      点击:

名称

激发光波长(nm)

发射光波峰(nm)

相对强度(1 =最低,5 =最高)

用途和用法

eFluor® 605NC

405

605

2

紫光激光器激发
可以完好的替代 Pacific Orange®.
eFluor® 605NC 可以与 eFluor® 450联合使用
适用于丰度较高的抗原

eFluor® 625NC

405

625

2

紫光激光器激发
eFluor® 625NC 可以与 eFluor® 450联合使用
适用于丰度较高的抗原

eFluor® 650NC

405

650

3

紫光激光器激发
eFluor® 650NC 可以与 eFluor® 450联合使用
适用于丰度较高的抗原

eFluor® 450

405

450

2

紫光激光器激发
eFluor® 450 可以与 Pacific Blue®交替使用
能与 eFluor® 605NC 或 eFluor® 625NC一起使用
适用于丰度较高的抗原

Alexa Fluor® 405

405

421

1

紫光激光器可以激发很弱的荧光
只适用于高丰度的抗原

Pacific Blue®

405

455

2

紫光激光器激发
Pacific Blue® 可以与 eFluor® 450交替使用
典型的弱荧光基团
只适用于高丰度的抗原

Alexa Fluor® 430

405

541

1

仅供作为紫光管的备用荧光物质

Pacific Orange®

405

551

1

只适用于高丰度的抗原
由于Pacific Orange®发射光波长为551nm可以与 Pacific Blue® 共染进行多色流式细胞分析
eFluor® 605NC 是荧光较强的替代品

FITC (Fluorescein Isothiocyanate)

488

518

3

大多数仪器在 FL1 通道检测.适用于荧光显微镜技术

Alexa Fluor® 488

488

519

3

大多数仪器在 FL1 通道检测.
具有耐光性和PH依赖性
是荧光显微镜技术的绝佳选择

R-PE (R-Phycoerythrin)

488

575

5

R-PE又称藻红蛋白,有RDI的别称,其标记的抗体适用于所有配备488nm氩离子激光器的流式细胞仪。

大多数仪器在 FL2通道检测.
具有很高的光量子产量,适用于低丰度抗原检测。

光淬灭性较强,不适用于传统的荧光显微镜技术,而其标记的抗体却已广泛应用于激光共聚焦显微镜技术。

PE-Texas Red

488

615

3

单激光管FL3通道检测

PE-Alexa Fluor® 610

488

628

3

PE-Texas Red 荧光染料的替代品与PE的荧光补偿较小,对FC介导的非特异性结合较PE-Cy5小.

PE-Cy5

488

667

4

多数仪器在FL3或者 FL4 通道检测
当用于双激光器仪器的 APC 通道时需要注意调节激光器之间的荧光补偿
光淬灭性强,不适用于传统的荧光显微镜技术
可与FITC,PE搭配,荧光补偿较小;不宜与APC搭配

PE-Cy5.5

488

695

3 to 4

多数仪器在FL3或者 FL4 通道检测
光淬灭性强,不适用于传统的荧光显微镜技术
可与FITC、PE、APC搭配,荧光补偿较小、

PerCP-Cy5.5

488

695

3

多数仪器在FL3或者 FL4 通道检测
可与FITC、PE、APC搭配,荧光补偿较小
量子产量较低,最好用于高丰度抗原的检测

PerCP-eFluor® 710

488

710

4

多数仪器在FL3 通道检测
是PerCP-Cy5.5光量子产量的2-3倍

PE-Cy7

488

785

3

选用合适的滤光片
BECKMAN用FL4通道检测,BD仪器用FL3通道检测。
可与FITC、PE、APC搭配,与FITC无重叠,与PE和APC荧光补偿较小
光淬灭性强,染色处理时要注意避光

7-AAD

488

647

--

多数仪器在FL3 通道检测
能够选择性的与DNA的G-C碱基结合
用于区分死细胞和活细胞

Propidium Iodide (PI)

488

617

--

在FL2 通道检测
室一种嵌入性核酸荧光染料,可选择性的嵌入DNA和RNA的碱基对中。
用于区分死细胞和活细胞
利用PI进行细胞周期分析的时候需要对细胞进行固定和破膜。

Alexa Fluor® 532

532

561

3

用于配有合适的滤光片通道的流式细胞仪
光耐受强 并且不依赖于PH值 
是荧光显微镜技术的最佳选择

R-PE (R-Phycoerythrin)

532 - 561

578

5

大多数仪器在 FL2通道检测.
具有很高的光量子产量,适用于低丰度抗原检测。

光淬灭性较强,不适用于传统的荧光显微镜技术,而其标记的抗体却已广泛应用于激光共聚焦显微镜技术。

PE-Texas Red

532 - 561

615

3

单激光流式细胞仪在FL3通道检测

PE-Cy5

532 - 561

667

4

多数仪器在FL3或FL4通道检测 
与APC共用时需要调整较大的荧光补偿,所以不建议二者共用

PE-Cy5.5

532 - 561

695

3 to 4

多数仪器在FL3或FL4通道检测 
能和APC共用,但仍需调补偿,是双激光器流式细胞仪的最佳荧光

PE-Cy7

532 - 561

785

3

用于配有合适的滤光片通道的流式细胞仪
与其他荧光共用的时候有微小的干扰,需要微调荧光补偿

APC (Allophycocyanin)

633

660

4

适用于配备氦氖激光器或红色二极管激光器的流式细胞仪,BD仪器在FL4通道检测,Beckman仪器在FL3通道检测
可代替Cy5 或Alexa Fluor® 647

eFluor® 660

633

660

4

eFluor® 660 是 Alexa Fluor® 647的替代荧光
在双激光器仪器的FL4通道检测
可以替代APC
光稳定性好,适合于荧光显微镜技术

Alexa Fluor® 647

633

668

4

在双激光器仪器的FL4通道检测
可代替Cy5 或Alexa Fluor® 647
光稳定性好,适合于荧光显微镜技术

Cy5

633

670

3

在双激光器仪器的FL4通道检测
可与APC 或Alexa Fluor® 647互换使用
是胞内染色和荧光显微镜技术的最佳选择

APC-Cy5.5

633

690

3

选择适合的通道
多用于四色流式细胞染色

Alexa Fluor® 700

633

723

2

虽然氦氖激光器不能较好的激发,但是仍会有一定的荧光发射光
需要选用合适的滤光片
多数仪器需要 685 LP 反射镜and 710/20 滤波器

APC-eFluor® 780

633

780

2

需要选用合适的滤光片
光稳定性较APC-Cy7好。
APC 分子 与eFluor® 780偶联而成的荧光染料
APC-Cy7, APC-Alexa Fluor® 750 和 APC-eFluor® 780 可以互换使用。

APC-Alexa Fluor® 750

633

775

2

需要选用合适的滤光片
光稳定性较APC-Cy7好。
APC 分子 与eFluor® 750偶联而成的荧光染料
A APC-Cy7, APC-Alexa Fluor® 750 和 APC-eFluor® 780 可以互换使用。