崔工，我标的FITC不太成功

好像和其他细胞、杂质全都结合了

能帮我看看是什么原因吗？

M老师在快要下班的时候给崔工发来信息

能看得出M老师很着急，趁着还没有下班感觉向崔工寻求帮助。

不过M老师不用急，正常情况下崔工的手机基本上都在身边的，只要崔工看到消息了都会回，不会因为下班了就不回老师们的信息。

M老师可以太着急了，没有把问题说清楚，崔工没法帮忙分析具体的原因，就一步一步询问具体的细节。

您标记的不是抗体？

是的，标记的是抗体，CD3抗体。

那崔工能猜出是怎么样一个情况，M老师可能是用FITC标记CD3抗体，再把标记好的荧光抗体加入样本中上机检测。

结果发现不单单是表达CD3抗体的细胞被染色了，而是所有的细胞都被染色了。

崔工把猜测跟M老师确认。

M老师说，对的，就是这样，崔工你看图是这样的。

如果是这个问题，那崔工心里有底了，不是大问题。

为什么这么说？

因为在前段时间苏州的L老师也遇到过同样的问题，崔工跟L老师交流后，问题就解决了。

但崔工不能直接把上次解决方案告诉M老师，怎么怎么做。

崔工还是按部就班的帮M老师梳理每个环节。

崔工问：你标记好抗体后有没有去除多余的抗体或者FITC。

有的，用的是您家的蛋白离心式快速脱盐柱。

M老师并不知道崔工心里已经知道是什么原因了，她还是很焦急的问道。

有哪些原因会导致实验失败呢，按道理FITC标记抗体是荧光染料标记抗体里最简单的。

是的，FITC是荧光染料标记抗体里最简单的，简单但并不能代表一定就能马上做成功。

崔工继续回答道，能跟杂质、所有细胞都结合了，那说明肯定是有游离的FITC。

了解FITC标记抗体原理的都知道，FITC是很容易就和蛋白结合的。

如果抗体跟FITC交联后，没有把未交联的FITC，也就是大家说的游离的FITC去除掉，游离的FITC是极易与蛋白结合。

这就很有可能出现前面M老师反应的那样，其他细胞、杂质全都被染上了颜色。

既然已经知道问题所在了，那我们就想办法把游离的FITC去除。

在以前的文章样本的脱盐方法有哪些？中，崔工介绍了3种方法，分别是超滤管、离心式快速脱盐柱和透析袋。

在文章中，崔工分析了各种方法的优缺点，总结出，最快、最便捷的是用离心式快速脱盐柱。

崔工告诉M老师选择一种方式把游离的FITC去除掉就可以了。

过几天崔工询问M老师，实验进行的怎么样，问题是否解决。

M老师很感激崔工，他的问题已经解决了。