链霉亲和素SA是如何起到信号放大作用的
2022-08-17 18:45:56 点击:
链霉亲和素(Streptavidin,简称SA)是与亲和素有相似生物学特性的一种蛋白质。
链霉亲和素,分子量约为65kDa,等电点6.0,是从链霉菌Streptomyces Avidinii培养物中提取的一种分泌性蛋白质。
它的结构式如下:
链霉亲和素具有与生物素高度特异性结合的能力。
又由于它是四聚体蛋白,有四个高亲和力生物素结合位点。
一个链霉亲和素就可以高度特异性地与四个生物素结合。
1个链霉亲和素就可以结合4个生物素化的抗体。
就单单的链霉亲和素-生物素抗体复合物是不能发光,不能被仪器所识别。
于是就在与生物素抗体结合之前,让链霉亲和素先与藻红蛋白PE偶联,形成链霉亲和素SA与藻红蛋白PE偶联后的复合物。
也就是我们经常说的SAPE。
当SAPE与生物素抗体结合后就带上了荧光。
这个运用到流式上的检测原理就是这样的:
结合前面提到的一个链霉亲和素就可以高度特异性地与四个生物素结合。
这样它的荧光信号就起到了放大的作用。
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