Protein AGL

更新:2017-06-08 07:46:36      点击:
  • 产品编号:   P0109
  • 产品规格:   5MG
  • 产品价格:   1500
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产品介绍


编号

描述

规格

P0101

ThumbTM Protein AGL抗体纯化琼脂糖

湿胶25 mL; 100 mL; 300 mL; 500 mL

P0102

ThumbTM Protein AGL抗体俘获琼脂糖磁珠

1 mL,20%悬液

D0101

ThumbTM Protein AGL HRP探针

1 mL,0.5 mg/mL

D0201

ThumbTM免疫沉淀分析套装

40反应

D0102

ThumbTM Protein AGL胶体金探针

10 mL悬液

P0109

ThumbTM Protein AGL

5 mg

产品描述


    Protein AGL为组合了Protein A, G和L全部免疫球蛋白结合区域的重组融合蛋白,其结合能力涵盖除IgY之外所有生物医学常用宿主动物的免疫球蛋白,包括抗体各种类如IgG、IgM、IgA、IgE和IgD、它们的亚类以及抗体片段如Fab、scFv和sdAb。因此,Protein AGL具有最广的免疫球蛋白(抗体)结合谱。对特定的免疫球蛋白分子而言,Protein AGL可在多个位点上通过协同效应而产生最高结合力和最大结合量。此外,Protein AGL特异地与天然活性免疫球蛋白表面构象位点结合,不与丧失了该天然构象的变性或失活的免疫球蛋白结合。

产品应用


1、抗体纯化中的应用

  对于诊断或科研用的中小规模抗体纯化,Protein AGL配体对样品中天然活性部分具有更多的结合位点、更高的结合量和更广的结合谱。例如,GE的Protein A琼脂糖无法结合纯化占全部小鼠单抗50%的IgG1亚型以及Fab和scFv重组片段,而Protein AGL可以高效纯化任何亚型的小鼠单抗以及任何抗体片段;GE的HiTrap Protein G或A对人IgG亲和吸附容量仅为20~25 mg/mL(湿胶体积),而Protein AGL琼脂糖对人IgG亲和吸附容量高达60 mg/mL(湿胶体积)。

    1)Protein AGL琼脂糖:适用于10到100毫克各类天然活性抗体的血清、重组抗体培养液、杂交瘤培养液、腹水样品的重力柱或自动化色谱柱纯化。

    2)Protein AGL琼脂糖磁珠:适用于含1到10毫克抗体、体积在10毫升以下各类天然活性抗体样品纯化。

2、免疫沉淀分析中的应用

    相对于传统的Protein A或G磁珠,Protein AGL琼脂糖磁珠可以对各类抗体做高效率的免疫沉淀,而Protein A磁珠不能俘获占小鼠单抗50%的IgG1亚型。相对于传统的二抗探针而言,Protein AGL HRP探针适用于各种一抗的高灵敏度检测,也不因生产所使用的动物和免疫原而异;更重要的是,它只检测具有天然表面构象的活性抗体,因而它在免疫沉淀之后的免疫印迹检测中仅检测与抗原结合的活性一抗,避免了常规二抗检测中与免疫沉淀物相伴的变性一抗重链和轻链条带的干扰。此外,传统的Protein A HRP探针对抗体结合位点单一而检测灵敏度低,且不检测占小鼠单抗50%以上的IgG1亚型。

3、Protein AGL检测应用

    Protein AGL检测免疫球蛋白比单独的Protein A, G或L试剂具有更广的抗体结合谱以及更高的检测灵敏度,因为它含有更多的协同结合检测位点;比如,基于Protein A的探针检测位点少而导致检测灵敏度低,且不能够检测占小鼠单抗50%以上的IgG1亚型。此外,源于抗血清的传统二抗探针因其生产所用的动物和免疫原而异,含有针对变性抗体抗原决定基的杂质抗体而产生针对样品中变性免疫球蛋白成分或同源蛋白的非特异性干扰信号。因而,Protein AGL探针是目前市场上最特异和最灵敏的针对一抗的二级检测优质试剂,具有显著优势以取代传统二抗探针。

    Protein AGL探针适用于免疫印迹检测、免疫组化分析、感染诊断中的抗体检测、小分子抗原检测以及单克隆抗体筛选。

    1)免疫印迹:在含有待检蛋白的膜上,先使用一抗和目的抗原结合,再用单一的、质量稳定的Protein AGL HRP探针以及配套的ECL化学发光底物进行检测。Protein AGL探针在检测兔多抗一抗时灵敏度比传统羊抗兔二抗探针高,在检测小鼠单抗一抗时灵敏度和传统羊抗鼠二抗探针相当;在检测含内源性类免疫球蛋白的样品或含一抗的免疫沉淀样时,Protein AGL探针与这些变性的类免疫球蛋白成分不结合,避免了传统二抗探针引起的那些非特异杂带信号,得到本底干净的印迹检测。

    2)定量免疫印迹:在同个印迹膜上检测目的蛋白以及稳定表达的参考蛋白,可以用目的蛋白相对参考蛋白的比值来矫正样品上样量和转膜效率的差异,便于准确测定该目的蛋白表达水平。如果这两个蛋白分子量比较接近,它们的检测信号会相互干扰,这时需要它们分别检测,也就需要在第一个信号检测完后将其抗体探针去除。Protein AGL HRP探针是定量免疫印迹的最佳选择,因为它对变性的抗体探针不结合检测,所以第一信号的抗体探针可以在比较温和的条件下做变性处理,并不需要苛刻条件将它从膜上去除,也避免了膜上第二信号蛋白的损失。如果用传统的二抗探针,第一信号探针抗体必须从膜上去除干净,不然在第二信号检测时它会造成本底干扰,而严苛的去抗体方法也容易造成第二信号蛋白的损失。

    3)免疫组化分析:在含有目的抗原的组织切片上,先使用一抗,再用Protein AGL HRP探针以及配套的DAB或TMB显色底物进行检测。由于Protein AGL探针只与和目的抗原结合的活性一抗,与经过固定处理的变性内源性免疫球蛋白或同源蛋白不会结合,避免了传统二抗探针与这个变性的内源性成分结合而产生的本底。

    4)感染试纸条快速诊断:在包被感染原抗原的试纸条上,使用胶体金标记的Protein AGL试剂检测感染引起的人体抗体。质控线可以使用便宜的人免疫球蛋白,不需要较为昂贵的羊抗人二抗。

    5)感染ELISA:在包被感染原抗原的微孔板上,使用HRP标记的Protein AGL探针以及配套的可溶性TMB底物,检测感染引起的人体特异抗体。

    6)HIV免疫印迹:HIV抗体检测呈阳性者,需要做免疫印迹检测以确诊。HIV抗原经电泳分离后转移到膜上,将此膜与含感染相关抗体的人样品结合温育,再用Protein AGL试剂检测。如果使用HRP标记,可以用沉淀性TMB底物显色;如果胶体金标记,肉眼可直接观察。

    7)毒品(小分子抗原)ELISA:样品毒品与包被在微孔板上的毒品竞争结合限量的毒品抗体,剩余在板上的抗体即可以用Protein AGL HRP探针以及配套的可溶性TMB检测。

    8)单克隆抗体筛选:在包被抗原的微孔板上加入杂交瘤分泌抗体上清液,再加入Protein AGL HRP探针,各种亚型的单克隆抗体可以得到高灵敏度的检测。

    9)试纸条质控样:未标记的Protein AGL包被在质控线上,可以质控任何抗体胶体金。

4、免疫凝聚反应增敏剂

  用包被抗原的乳胶和血清中待测肝炎抗体发生凝聚反应就是一个免疫比浊分析的例子;ABO血型分析也是针对红细胞表面抗原的抗体引发的凝聚反应。在这些免疫凝聚反应中加入羊抗人二抗会增加分析灵敏度,因为二价的二抗可以把低度凝聚体进一步交联起来形成更大的凝聚体。

  Protein AGL是比二抗更优异的免疫比浊分析增敏剂,因为它有三个和免疫球蛋白结合的价值,凝聚一抗的能力更强。我们把二抗加到一定浓度的一抗溶液里,看不到混浊沉淀;如果加等量的Protein AGL到同样浓度的一抗溶液里,肉眼即可以看到大量混浊沉淀!所以我们的Protein AGL是比二抗更有效的免疫比浊分析增敏剂,也没有二抗那种动物和批间差异和昂贵制备成本。

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